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植物吲哚乙酸(IAA)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)類型:夾心法

更新時(shí)間:2018-12-26      瀏覽次數(shù):1650

植物吲哚乙酸(IAA)ELISA試劑盒

英文名稱:Plant IAA ELISA Kit
實(shí)驗(yàn)類型:夾心法
檢測(cè)范圍:0.625 μmol/L – 20 μmol/L
低檢測(cè)限:0.1 μmol/L
應(yīng)用范圍:血清、血漿、組織勻漿、細(xì)胞培養(yǎng)物上清或其它相關(guān)液體(本產(chǎn)品僅供實(shí)驗(yàn)室科研及非臨床用途)

實(shí)驗(yàn)原理

試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)。往預(yù)先包被植物吲哚乙酸(IAA)捕獲抗體的包被微孔中,依次加入標(biāo)本、標(biāo)準(zhǔn)品、HRP標(biāo)記的檢測(cè)抗體,經(jīng)過溫育并*洗滌。用底物TMB顯色,TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成終的黃色。顏色的深淺和樣品中的植物吲哚乙酸(IAA)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm 波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度(OD 值),計(jì)算樣品濃度。

 

植物吲哚乙酸(IAA)ELISA試劑盒組成

試劑盒組成96孔配置48孔配置備注
微孔酶標(biāo)板8孔×12條8孔×6條 無
標(biāo)準(zhǔn)品0.3mL×6管0.3mL×6管
樣本稀釋液6mL3mL
檢測(cè)抗體-HRP10mL5mL
20×洗滌緩沖液25mL15mL按說明書進(jìn)行稀釋
底物A6mL3mL
底物B6mL3mL
終止液6mL3mL
封板膜2張2張
說明書1份1份
自封袋1個(gè)1個(gè)
 

 

操作步驟

1. 從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃。

2. 設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔,標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50μL;

3. 樣本孔中加入待測(cè)樣本50μL;空白孔不加。

4. 除空白孔外,標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶(HRP)標(biāo)記的檢測(cè)抗體100μL,用封板膜封住反應(yīng)孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。

5. 棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液(350μL),靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復(fù)洗板5次(也可用洗板機(jī)洗板)。

6. 每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。

7. 每孔加入終止液50μL,15min內(nèi),在450nm波長(zhǎng)處測(cè)定各孔的OD值。

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